靈芝孢子油抗移植性肉瘤實驗報告
一、材料與方法
1.1 材料
1.1.1 中科牌靈芝孢子油軟膠囊,批號20020925;南京中科生化技術有限公司提供。為橙黃色油狀液體,加少量吐溫-80充分研磨,并邊研磨邊加蒸餾水配制成所需濃度;氟脲嘧啶(5-Fu)南通制藥廠生產批號020513,蒸餾水配制;以上均4℃保存備用。
1.1.2 KM小鼠雌雄各半,體重18-22g,由南京青龍山實驗動物飼養中心提供,實驗動物生產許可證號:SCXK(蘇)2002-0018號。
1.1.3 小鼠移植性模型:實體型S180,由中國科學院上海研究所提供,本所動物房傳代保種。
1.1.4 儀器設備:醫用凈化臺YJ-1450S,蘇州凈化設備公司;BS110S電子天平,德國Sartorius。
1.2 方法
1.2.1 抗移植性實驗方法:取健康、生長旺盛的S180荷瘤小鼠,頸椎脫臼處死,無菌條件下取出瘤塊,制備成單細胞懸液,調節細胞濃度為1×108/ml,接種于健康小鼠右前肢下,每只0.2ml。接種24小時后隨機分組,每組10只,分對照組(給予H2O),給藥組(分別給予不同劑量的中科牌靈芝孢子油軟膠囊)和陽性藥對照組(5-Fu)并開始灌胃給藥(ig),每日一次,連續8日。停藥24小時后頸椎脫臼處死小鼠,稱體重,解剖剝離瘤塊,稱瘤重,對照組平均瘤重1克以上可進行結果分析。按公式計算抑瘤率,t檢驗統計處理。抑瘤率≥30%以上判斷為有一定的抗作用。
1.2.2 對荷瘤小鼠免疫器官重量的影響:實驗方法同1.2.1,停藥24小時后處死小鼠,解剖取胸腺、脾臟、洗凈吸干,稱重,按公式計算脾指數、胸腺指數。
對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重
抑瘤率(%)= &靈芝的栽培技術 一、配制養料 ?、匐s木屑約75%,麥麩約25%,硫酸銨約0.2%,拌料含水量70%;②雜木屑約75%,麥麩約25%,拌料含水量60%;nbsp; ×100%
對照組平均瘤重
脾臟重量mg
脾指數(%)= ×100%
體重g
胸腺重量mg
另外,市場上銷售的某些靈芝制劑系靈芝與茶葉的混可置菌種在清潔干燥、冷凍、低溫、缺氧的環境中保存?,F具體介紹以下幾種方法:木屑保存菌種法 選用闊葉雜木屑78%、麥麩20%、白糖、石膏各1%,加適當的水調濕,分裝試管,占試管的三分之四長,在1.2至1.5公斤每平方厘米高壓下滅菌40分鐘左右,合體,部分人有飲茶習慣。茶葉中含有咖啡因,能興奮中樞,飲茶后尿量增加,過多夜尿影響。胸腺指數(%)= ×100%
體重g
二、結果
靈芝孢子油以300mg·kg-1,600 mg·kg-1和1200 mg·kg-1灌胃給藥,對小鼠移植性肉瘤S-180的實驗結果見表8-17。對荷瘤小鼠免疫器官重量的影響見表8-18。
靈芝孢子油在本實驗劑量范圍內抑瘤率為48.06%-59.69%(P<0.05),有良好的抑瘤作用,其抑瘤作用呈良好的量效關系??稍黾覵-180荷瘤小鼠免疫器官重量,給藥組脾指數、胸腺指數有所上升,提示其有刺激免疫功能作用。
表8-17 靈芝孢子油對小鼠移植性肉瘤S-180的抑制作用(n=10)
分組
劑量
mg·kg-1×d
給藥途徑
動物數
始/終
體重變化(g)
給藥前/給藥后
瘤重(g)
X±S
抑瘤率
%
H2O
孢子油
孢子油
孢子油
5-Fu
300×8
600×8
1200×8
25×8
ig
ig
ig
ig
ig
10/10
10/10
10/10
10/10
10/10
18.5/23.5
18.4/22.9
18.6/19.7
18.5/19.3
18.7/21.7
1.29±0.61
0.67±0.32*
0.56±0.29**
0.52±0.22**
0.67±0.21*
48.06
56.59
59.69
48.06
*P<0.05, ***P<0.01與對照組比
表8-18 靈芝孢子油對小鼠S-180肉瘤免疫器官重量的影響(n=10)
分組
劑量
mg·kg-1×d
給藥
途徑
動物數
始/終
脾指數
X±S
胸腺指數
X±S
H2O
孢子油
孢子油
孢子油
5-Fu
300×8
600×8
1200×8
25×8
ig
ig
ig
ig
ig
10/10
10/10
10/10
10/10
10/10
73.48±17.07
70.79±20.29
82.50±27.94
78.96±25.14
37.84±17.86
35.56±12.04
40.96±19.58
36.50±12.63
42.50±23.63
37.63±15.31
*P<0.05,**P<0.01與對照組比
結論:靈芝孢子油對Heps及S-180肉瘤都有明顯抑制作用,其抑瘤作用呈良好的量效關系,并且對非特異性免疫功能有較強的增強作用。靈芝孢子油在方面具有很好的應用前景。
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本文關鍵詞: 孢子
小鼠
靈芝
肉瘤
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